实验室中用于蛋白表达的本生烟

　　“没想到会做出这样的成果，更没想到自己原来揣了块宝。”谈及近日发表于《细胞》的研究成果，郭广昊连称“没想到”。
　　郭广昊目前在中国科学院遗传与发育生物学研究所（以下简称“遗传发育所”）研究员刘志勇团队从事博士后研究。从攻读硕博学位至今，他已在这个团队度过了11年。
　　在这项新成果中，他与中英两国导师及国内外同事一道，揭开植物“过度免疫”机制的面纱。其实，这项研究是郭广昊当年为博士毕业准备的“备胎”项目，无心插柳柳成荫，在多方合作下，启动7年的“备胎”竟然转正了。
 　 选一株“病态”小麦做“备胎”
　　2018年春天，在遗传发育所位于河北高邑的小麦试验田里，几千行经过诱变处理的小麦材料正在生长——有的株高变矮、有的叶片变黄、有的叶片卷曲……突变表型五花八门、形态各异。它们是刘志勇为改良具有超高产潜力的骨干品系“中科331”布下的一局棋。
　　“对这个品系进行诱变，是为了在高产的基础上，提高它的抗病性。”刘志勇介绍说。
　　当时，在刘志勇团队读博的郭广昊，主攻课题是解析小麦抗白粉病基因Pm5e的抗性机制。白粉病是小麦顽疾，我国每年受其影响的小麦面积约1亿亩，重病田减产甚至达40%。那段时间，他的研究并不顺利。
　　“我想在毕业时讲一个完整、精细的故事，于是决定去找一个‘备份’课题。”郭广昊回忆说。
　　新课题从何而来？通常，育种家关注的都是试验田里表现优异的小麦，因为这意味着后代性状更优，但郭广昊的目光却被试验田里的一株“病态”小麦吸引：这株突变体小麦确实提高了白粉病抗性，但植株矮小、叶片自发坏死。凭直觉，郭广昊判断这可能与植物“过度免疫”反应有关。
　　在生物学领域，植物如何维持并调控自身免疫能力，同时避免过度免疫，是备受关注的热点与难点问题。
　　2020年，郭广昊克隆了导致小麦叶片坏死的基因WAI3。不过，此后这个“备胎”课题便被搁置了。一方面，他的主课题迎来转机；另一方面，他觉得只发现一个基因，科学新意尚显单薄。
　　这一放，就是两年多。
　　2023年5月至2024年7月，在刘志勇的大力支持下，郭广昊入选“中国科学院青年科技人才中长期出国培训专项项目”，赴英国塞恩斯伯里实验室访学，师从植物免疫学泰斗JonathanJones，继续聚焦抗白粉病基因Pm5e机制研究。在那里，郭广昊遇到了同样毕业于遗传发育所的博士后赵赫，两人十分投缘。他们的实验台紧挨着，经常一起探讨科研问题。一次讨论中，郭广昊提起那个被他搁置的WAI3基因。
　　“师兄，有没有兴趣一起做？”郭广昊发出邀请后，两人一拍即合，在中英两国导师的共同指导下，开始跨国联合攻关。
　　推开免疫“新窗”
　　基因表达的“流量控制”是一大难题。WAI3是一个自激活型免疫受体，其氨基酸突变使蛋白持续处于开启状态，在转基因实验功能验证阶段，会不断触发免疫反应导致细胞死亡。
　　“我们最开始用的是强启动子，相当于把‘阀门’开到最大。本想让基因多表达，性状更容易出现，结果发现植株坏死得太快，根本拿不到成活的麦苗。”郭广昊解释，由于DNA被高强度转录为RNA，再大量翻译成蛋白，免疫反应被持续放大，幼苗还没长出来就已被过度免疫杀死。
　　为此，他们调整策略，改用WAI3基因自身启动子，降低表达强度，将“阀门”拧小，最终让植株存活到可观测阶段。
　　更大的挑战来自蛋白质提纯。结构解析需要高纯度、构象一致的蛋白质，但WAI3编码的受体蛋白极不稳定且易聚集。他们在茄科植物——本生烟中不断优化提取与纯化条件，改进蛋白表达策略，终于攻克了这一关。
　　在植物与病原微生物的长期博弈中，免疫受体NLR扮演着关键角色。研究表明，激活后的部分NLR可分别形成五聚体、六聚体等抗病小体，并引发细胞质内的钙离子内流，启动免疫反应，但一些特殊免疫受体——G10类型的NLR的激活和作用机制仍然未知，限制了该蛋白的有效利用。研究发现，WAI3基因编码CCG10-NLR蛋白为了解这类蛋白的抗病机制提供了机会。
　　冷冻电镜分析显示，激活后的WAI3形成了一个由8个单体组成的“八聚体”结构，位于细胞膜，形成了类似“通道”的复合体。郭广昊解释说：“可以把细胞想象成一个房间，膜上有很多窗户。正常情况下窗户是关着的，但WAI3像一个失控的开关，让‘窗户’一直敞开，钙离子不断灌入，从而持续触发免疫反应。”基于此，他们揭示了植物免疫系统过度激活的机制。
　　“我们的研究相当于提供了G10类型NLR发挥免疫机制的新证据。”郭广昊说。
　　“长期以来，由于基因组复杂和多倍体等特性，小麦基础研究落后于模式植物，但近年来，小麦生物学研究中的一系列新发现，为植物学研究提供了新的‘模式’。”刘志勇说。
　　研究团队还将视角延伸到拟南芥中的同源蛋白RPS2。他们发现，WAI3与RPS2在进化上属于同一家族，RPS2在激活后同样可形成八聚体抗病小体结构，引发钙离子内流，表明G10类型NLR抗病蛋白的作用机制在不同植物中具有高度保守性。
　　刘志勇深耕小麦研究多年，过去十年间，带领团队克隆了14个小麦抗病基因，约占全世界克隆总量的1/5。
　　“可以说，我们在这一领域处于国际领先地位。”在刘志勇看来，做农业研究要坚持“两条腿走路”——深耕基础研究的同时，推动成果落地。“找到WAI3这个基因，搞清楚自激活过度免疫的原理，就可以利用人工智能辅助设计进行定点氨基酸突变，创制出具有抗病特性但不过度激活免疫的新抗病蛋白，同时保持高产特性。”
　　未来，他们的目标是精准、智能地设计出更多抗病高产品种，减少农药依赖，占领国际基因资源高地，为保障粮食安全和百姓健康出一份力。
　　（据《中国科学报》2026年4月3日第1版，有删节）